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Kit de détection par PCR en temps réel pour Mycoplasma Synoviae
【Nom du produit】Kit de détection par PCR en temps réel pour Mycoplasma Synoviae (MS)
【Emballer】50 trousses/boîte
【Indication】Le kit de détection PCR en temps réel pour Mycoplasma Synoviae est applicable pour détecter l'ADN de Mycoplasma Synoviae dans des échantillons respiratoires aviaires, des tissus pulmonaires et d'autres échantillons.Les résultats des tests sont à des fins de recherche uniquement et non à des fins de diagnostic clinique.
【Principaux composants et contenu】
Nom | spécification | Quantité |
Solution de double réaction MS | 900µl/Tube | 1 |
Contrôle MS double positif | 100µl/Tube | 1 |
Contrôle négatif | 100µl/tube | 1 |
【Stockage et durée de conservation】
Stocké à -20 ± 5 ℃, congélation et décongélation répétées ≤ 3 fois, la durée de conservation est de 12 mois.
【Théorie】
Ce kit est basé sur la technologie PCR fluorescente en temps réel. Il sélectionne le virus sauvage de Mycoplasma Synovies et la région conservée de la souche vaccinale MS-H comme régions cibles d'amplification, conçoit des sondes d'amorce spécifiques et marque différents groupes fluorescents, et effectue des tests qualitatifs. détection de Mycoplasma Synoviae par amplification du système PCR fluorescent en temps réel en une étape. En plus des amorces spécifiques et des sondes fluorescentes, le système de réaction est également équipé du tampon PCR correspondant, de l'enzyme Taq.dNTP, Mg2+ et autres composants, qui peuvent réaliser une détection sensible et spécifique de l'acide nucléique MS, et identifier le virus sauvage et la souche vaccinale MS-H.
【Instrument】ABI 7500, ABI 7300, LightCycler480 ou d'autres instruments PCR quantitatifs fluorescents identiques.
【Exigence d'échantillon】
Prélèvements respiratoires et prélèvements pulmonaires.
【Méthode d'essai】
1. Extraction d'acide nucléique
Le kit d'extraction d'ADN commercialisé peut être réalisé pour l'extraction d'acide nucléique, veuillez suivre les instructions du kit.
2. Amplification PCR
2.1 Calculez le nombre d'échantillons à tester, prenez n+2 tubes de réaction PCR et ajoutez 18 µl de solution réactionnelle dans chaque tube.
2.2 Ajoutez 2 µl d'acide nucléique de contrôle négatif, de contrôle positif et d'échantillons d'acide nucléique dans les tubes de réaction PRC ci-dessus respectivement, centrifugez à 8000 tr/min pendant plusieurs secondes et placez-les dans l'amplificateur PCR quantitatif fluorescent.
3. Amplification qR-T-PCR
3.1 Sélection du canal de fluorescence
Reporter Dye1 : sélectionnez le canal FAM pour détecter la souche vaccinale MS-H, Quencher Dye : AUCUN
Reporter Dye2 : sélectionnez le canal VIC ou HEX pour détecter la souche de virus sauvage MS, Quencher Dye2 : AUCUN, référence passive : AUCUNE.Reportez-vous au manuel de l'instrument pour les autres instruments.
3.2 Les conditions de réaction sont fixées comme suit :
Paramètres d'amplification | |||
Système | Le volume total est de 25µl | ||
Conditions de réaction de la PCR | Phase | Conditions | Cycles |
Pré-dénaturation | 95℃ pendant 5 minutes | 1 | |
PCR | 95℃ pendant 10 secondes |
40 | |
60℃ pendant 30 secondes | |||
【Interprétation des résultats】
1. Les exigences suivantes doivent être satisfaites en même temps dans une expérience, sinon l'expérience n'est pas valide et doit être répétée.
Le contrôle négatif n'avait pas de courbe d'amplification
La courbe d'amplification du canal FAM témoin positif avait une phase de croissance logarithmique significative et la valeur Ct de la courbe d'amplification du canal FAM était ≤ 32.
2. Si le canal FAM de l'échantillon de test n'a pas de courbe d'amplification, l'échantillon peut être déterminé comme IBDV négatif.Si le canal FAM a une courbe d'amplification de phase de croissance logarithmique et la valeur Ct ≤ 36, qui peut être déterminée comme IBDV positive.36 < valeur Ct < 40 sont des échantillons suspects, qui doivent être retestés pour confirmation.
【Précautions】
1. La gestion du laboratoire doit être strictement conforme aux spécifications de gestion du laboratoire d'amplification génique par PCR.Le personnel du laboratoire doit être formé professionnellement.Le processus d'expérimentation doit être mené strictement dans différentes zones (zone de préparation des réactifs, zone de préparation des échantillons, zone d'amplification et d'analyse des produits).Tous les consommables doivent être jetables après stérilisation.Les appareils, équipements et fournitures spéciaux à chaque étape de l'opération expérimentale ne doivent pas être utilisés de manière croisée.
2. Veuillez préparer l'enceinte de sécurité biologique pour l'étape de préparation des réactifs et des échantillons.La blouse de laboratoire, les gants jetables et la pipette doivent être effectués pendant l'expérience.
3. La congélation et la décongélation répétées des réactifs doivent être évitées autant que possible.Avant utilisation, les réactifs doivent être complètement décongelés et centrifugés à 8 000 tr/min pendant plusieurs secondes.
4. Veuillez placer la pipette utilisée dans la zone de préparation des échantillons dans le récipient contenant le désinfectant et la jeter avec les déchets après la stérilisation.
5. Après l'expérience, la table de travail et le pipetteur ont été traités avec de l'hypochlorite à 10 % ou de l'alcool à 75 % ou une lampe ultraviolette.
【Fabrication】
Nom: Shandong Xinda Gene Technology Co., Ltd
Une filiale du Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Adresse: Bâtiment B2, parc industriel de Bandaohuigu, route de Shungeng, ville de Zhucheng, province du Shandong
Code postal : 262233
Téléphone : +86 - 0532 5882 0810
Kit de détection par PCR en temps réel pour Mycoplasma Synoviae
【Nom du produit】Kit de détection par PCR en temps réel pour Mycoplasma Synoviae (MS)
【Emballer】50 trousses/boîte
【Indication】Le kit de détection PCR en temps réel pour Mycoplasma Synoviae est applicable pour détecter l'ADN de Mycoplasma Synoviae dans des échantillons respiratoires aviaires, des tissus pulmonaires et d'autres échantillons.Les résultats des tests sont à des fins de recherche uniquement et non à des fins de diagnostic clinique.
【Principaux composants et contenu】
Nom | spécification | Quantité |
Solution de double réaction MS | 900µl/Tube | 1 |
Contrôle MS double positif | 100µl/Tube | 1 |
Contrôle négatif | 100µl/tube | 1 |
【Stockage et durée de conservation】
Stocké à -20 ± 5 ℃, congélation et décongélation répétées ≤ 3 fois, la durée de conservation est de 12 mois.
【Théorie】
Ce kit est basé sur la technologie PCR fluorescente en temps réel. Il sélectionne le virus sauvage de Mycoplasma Synovies et la région conservée de la souche vaccinale MS-H comme régions cibles d'amplification, conçoit des sondes d'amorce spécifiques et marque différents groupes fluorescents, et effectue des tests qualitatifs. détection de Mycoplasma Synoviae par amplification du système PCR fluorescent en temps réel en une étape. En plus des amorces spécifiques et des sondes fluorescentes, le système de réaction est également équipé du tampon PCR correspondant, de l'enzyme Taq.dNTP, Mg2+ et autres composants, qui peuvent réaliser une détection sensible et spécifique de l'acide nucléique MS, et identifier le virus sauvage et la souche vaccinale MS-H.
【Instrument】ABI 7500, ABI 7300, LightCycler480 ou d'autres instruments PCR quantitatifs fluorescents identiques.
【Exigence d'échantillon】
Prélèvements respiratoires et prélèvements pulmonaires.
【Méthode d'essai】
1. Extraction d'acide nucléique
Le kit d'extraction d'ADN commercialisé peut être réalisé pour l'extraction d'acide nucléique, veuillez suivre les instructions du kit.
2. Amplification PCR
2.1 Calculez le nombre d'échantillons à tester, prenez n+2 tubes de réaction PCR et ajoutez 18 µl de solution réactionnelle dans chaque tube.
2.2 Ajoutez 2 µl d'acide nucléique de contrôle négatif, de contrôle positif et d'échantillons d'acide nucléique dans les tubes de réaction PRC ci-dessus respectivement, centrifugez à 8000 tr/min pendant plusieurs secondes et placez-les dans l'amplificateur PCR quantitatif fluorescent.
3. Amplification qR-T-PCR
3.1 Sélection du canal de fluorescence
Reporter Dye1 : sélectionnez le canal FAM pour détecter la souche vaccinale MS-H, Quencher Dye : AUCUN
Reporter Dye2 : sélectionnez le canal VIC ou HEX pour détecter la souche de virus sauvage MS, Quencher Dye2 : AUCUN, référence passive : AUCUNE.Reportez-vous au manuel de l'instrument pour les autres instruments.
3.2 Les conditions de réaction sont fixées comme suit :
Paramètres d'amplification | |||
Système | Le volume total est de 25µl | ||
Conditions de réaction de la PCR | Phase | Conditions | Cycles |
Pré-dénaturation | 95℃ pendant 5 minutes | 1 | |
PCR | 95℃ pendant 10 secondes |
40 | |
60℃ pendant 30 secondes | |||
【Interprétation des résultats】
1. Les exigences suivantes doivent être satisfaites en même temps dans une expérience, sinon l'expérience n'est pas valide et doit être répétée.
Le contrôle négatif n'avait pas de courbe d'amplification
La courbe d'amplification du canal FAM témoin positif avait une phase de croissance logarithmique significative et la valeur Ct de la courbe d'amplification du canal FAM était ≤ 32.
2. Si le canal FAM de l'échantillon de test n'a pas de courbe d'amplification, l'échantillon peut être déterminé comme IBDV négatif.Si le canal FAM a une courbe d'amplification de phase de croissance logarithmique et la valeur Ct ≤ 36, qui peut être déterminée comme IBDV positive.36 < valeur Ct < 40 sont des échantillons suspects, qui doivent être retestés pour confirmation.
【Précautions】
1. La gestion du laboratoire doit être strictement conforme aux spécifications de gestion du laboratoire d'amplification génique par PCR.Le personnel du laboratoire doit être formé professionnellement.Le processus d'expérimentation doit être mené strictement dans différentes zones (zone de préparation des réactifs, zone de préparation des échantillons, zone d'amplification et d'analyse des produits).Tous les consommables doivent être jetables après stérilisation.Les appareils, équipements et fournitures spéciaux à chaque étape de l'opération expérimentale ne doivent pas être utilisés de manière croisée.
2. Veuillez préparer l'enceinte de sécurité biologique pour l'étape de préparation des réactifs et des échantillons.La blouse de laboratoire, les gants jetables et la pipette doivent être effectués pendant l'expérience.
3. La congélation et la décongélation répétées des réactifs doivent être évitées autant que possible.Avant utilisation, les réactifs doivent être complètement décongelés et centrifugés à 8 000 tr/min pendant plusieurs secondes.
4. Veuillez placer la pipette utilisée dans la zone de préparation des échantillons dans le récipient contenant le désinfectant et la jeter avec les déchets après la stérilisation.
5. Après l'expérience, la table de travail et le pipetteur ont été traités avec de l'hypochlorite à 10 % ou de l'alcool à 75 % ou une lampe ultraviolette.
【Fabrication】
Nom: Shandong Xinda Gene Technology Co., Ltd
Une filiale du Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Adresse: Bâtiment B2, parc industriel de Bandaohuigu, route de Shungeng, ville de Zhucheng, province du Shandong
Code postal : 262233
Téléphone : +86 - 0532 5882 0810
