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Kit de détection par PCR en temps réel pour Paratuberculosis Mycobacterium
【Nom du produit】Kit de détection par PCR en temps réel pour Paratuberculosis Mycobacterium
【Emballer】50 essais
【Indication】Le kit de détection PCR en temps réel pour Mycobacterium Paratuberculosis est applicable pour détecter l'ARN de Mycobacterium Paratuberculosis dans des échantillons d'écouvillon nasal, de lait et de liquide articulaire.Les résultats des tests sont à des fins de recherche uniquement et non à des fins de diagnostic clinique.
【Principaux composants et contenu】
Nom | spécification | Quantité |
Solution de réaction PMB | 1000µl/Tube | 1 |
Contrôle positif PMB | 250µl/Tube | 1 |
Contrôle négatif | 250µl/Tube | 1 |
【Stockage et durée de conservation】
Stocké à -20 ± 5 ℃, congélation et décongélation répétées ≤ 3 fois, la durée de conservation est de 12 mois.
【Méthode d'essai】
1. Extraction d'acide nucléique
Le kit d'extraction d'ARN commercialisé peut être réalisé pour l'extraction d'acide nucléique, veuillez suivre les instructions du kit.
2. Amplification PCR (Exemple d'ABI 7500, reportez-vous à ce mode d'emploi et manuel pour ABI 7300 et LC480.)
2.1 Calculer le nombre d'échantillons à tester, prendre n+2 tubes de réaction PCR et ajouter 20µl de solution réactionnelle dans chaque tube.
2.2 Ajouter 5 µl d'acide nucléique de contrôle négatif, de contrôle positif et d'échantillons dans les tubes de réaction PRC ci-dessus respectivement, centrifuger à 8 000 tr/min pendant plusieurs secondes et les placer dans l'amplificateur PCR quantitatif fluorescent.
3. Amplification qRT-PCR
3.1 Canal de signal de fluorescence : le mode de détection de la sonde est défini comme suit : Reporter Dye1 : FAM et Quencher Dye : NONE.
3.2 Les conditions de réaction doivent être fixées comme suit :
Paramètres d'amplification | |||
Système | Le volume total est de 25µl | ||
Conditions de réaction de la PCR | Phase | Conditions | Cycles |
Processus UNG | 37℃ pendant 2 minutes | 1 | |
Pré-dénaturation | 95℃ pendant 30 secondes | 1 | |
PCR | 95℃ pendant 10 secondes |
40 | |
60℃ pendant 30 secondes Réglé pour collecter le signal fluorescent à la fin de cette phase | |||
【Interprétation des résultats】
1. Le jugement de validité :
1.1 Contrôle positif : La valeur Ct du canal FAM ≤ 32, et la courbe d'amplification a une phase de croissance exponentielle significative.
1.2 Contrôle négatif : Le canal FAM n'a pas de courbe d'amplification, ou la courbe d'amplification est une ligne droite ou une légère ligne oblique.
2. Le jugement du résultat du test :
Si le canal de détection FAM de l'échantillon à tester a pas de courbe d'amplification, il peut être déterminé comme PMB négatif.
Si le canal de détection FAM a une courbe d'amplification à croissance exponentielle et que la valeur Ct est ≤ 36, il peut être déterminé comme PMB positif.
36 les échantillons doivent être considérés comme résultats douteux, et l'analyse doit être répétée pour confirmation.
【Précautions】
1. La gestion du laboratoire doit être strictement conforme aux spécifications de gestion du laboratoire d'amplification génique par PCR.Le personnel du laboratoire doit être formé professionnellement.Le processus d'expérimentation doit être mené strictement dans différentes zones (zone de préparation des réactifs, zone de préparation des échantillons, zone d'amplification et d'analyse des produits).Tous les consommables doivent être jetables après stérilisation.Les appareils, équipements et fournitures spéciaux à chaque étape de l'opération expérimentale ne doivent pas être utilisés de manière croisée.
2. Veuillez préparer l'enceinte de sécurité biologique pour l'étape de préparation des réactifs et des échantillons.La blouse de laboratoire, les gants jetables et la pipette doivent être effectués pendant l'expérience.
3. La congélation et la décongélation répétées des réactifs doivent être évitées autant que possible.Avant utilisation, les réactifs doivent être complètement décongelés et centrifugés à 8 000 tr/min pendant plusieurs secondes.
4. Veuillez placer la pipette utilisée dans la zone de préparation des échantillons dans le récipient contenant le désinfectant et la jeter avec les déchets après la stérilisation.
5. Après l'expérience, la table de travail et la pipette doivent être traitées avec de l'hypochlorite à 10 % ou de l'alcool à 75 % ou une lampe ultraviolette.
【Fabrication】
Nom: Shandong Xinda Gene Technology Co., Ltd
Une filiale du Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Adresse: Bâtiment B2, parc industriel de Bandaohuigu, route de Shungeng, ville de Zhucheng, province du Shandong
Code postal : 262233
Téléphone : +86 - 0532 5882 0810
Kit de détection par PCR en temps réel pour Paratuberculosis Mycobacterium
【Nom du produit】Kit de détection par PCR en temps réel pour Paratuberculosis Mycobacterium
【Emballer】50 essais
【Indication】Le kit de détection PCR en temps réel pour Mycobacterium Paratuberculosis est applicable pour détecter l'ARN de Mycobacterium Paratuberculosis dans des échantillons d'écouvillon nasal, de lait et de liquide articulaire.Les résultats des tests sont à des fins de recherche uniquement et non à des fins de diagnostic clinique.
【Principaux composants et contenu】
Nom | spécification | Quantité |
Solution de réaction PMB | 1000µl/Tube | 1 |
Contrôle positif PMB | 250µl/Tube | 1 |
Contrôle négatif | 250µl/Tube | 1 |
【Stockage et durée de conservation】
Stocké à -20 ± 5 ℃, congélation et décongélation répétées ≤ 3 fois, la durée de conservation est de 12 mois.
【Méthode d'essai】
1. Extraction d'acide nucléique
Le kit d'extraction d'ARN commercialisé peut être réalisé pour l'extraction d'acide nucléique, veuillez suivre les instructions du kit.
2. Amplification PCR (Exemple d'ABI 7500, reportez-vous à ce mode d'emploi et manuel pour ABI 7300 et LC480.)
2.1 Calculer le nombre d'échantillons à tester, prendre n+2 tubes de réaction PCR et ajouter 20µl de solution réactionnelle dans chaque tube.
2.2 Ajouter 5 µl d'acide nucléique de contrôle négatif, de contrôle positif et d'échantillons dans les tubes de réaction PRC ci-dessus respectivement, centrifuger à 8 000 tr/min pendant plusieurs secondes et les placer dans l'amplificateur PCR quantitatif fluorescent.
3. Amplification qRT-PCR
3.1 Canal de signal de fluorescence : le mode de détection de la sonde est défini comme suit : Reporter Dye1 : FAM et Quencher Dye : NONE.
3.2 Les conditions de réaction doivent être fixées comme suit :
Paramètres d'amplification | |||
Système | Le volume total est de 25µl | ||
Conditions de réaction de la PCR | Phase | Conditions | Cycles |
Processus UNG | 37℃ pendant 2 minutes | 1 | |
Pré-dénaturation | 95℃ pendant 30 secondes | 1 | |
PCR | 95℃ pendant 10 secondes |
40 | |
60℃ pendant 30 secondes Réglé pour collecter le signal fluorescent à la fin de cette phase | |||
【Interprétation des résultats】
1. Le jugement de validité :
1.1 Contrôle positif : La valeur Ct du canal FAM ≤ 32, et la courbe d'amplification a une phase de croissance exponentielle significative.
1.2 Contrôle négatif : Le canal FAM n'a pas de courbe d'amplification, ou la courbe d'amplification est une ligne droite ou une légère ligne oblique.
2. Le jugement du résultat du test :
Si le canal de détection FAM de l'échantillon à tester a pas de courbe d'amplification, il peut être déterminé comme PMB négatif.
Si le canal de détection FAM a une courbe d'amplification à croissance exponentielle et que la valeur Ct est ≤ 36, il peut être déterminé comme PMB positif.
36 les échantillons doivent être considérés comme résultats douteux, et l'analyse doit être répétée pour confirmation.
【Précautions】
1. La gestion du laboratoire doit être strictement conforme aux spécifications de gestion du laboratoire d'amplification génique par PCR.Le personnel du laboratoire doit être formé professionnellement.Le processus d'expérimentation doit être mené strictement dans différentes zones (zone de préparation des réactifs, zone de préparation des échantillons, zone d'amplification et d'analyse des produits).Tous les consommables doivent être jetables après stérilisation.Les appareils, équipements et fournitures spéciaux à chaque étape de l'opération expérimentale ne doivent pas être utilisés de manière croisée.
2. Veuillez préparer l'enceinte de sécurité biologique pour l'étape de préparation des réactifs et des échantillons.La blouse de laboratoire, les gants jetables et la pipette doivent être effectués pendant l'expérience.
3. La congélation et la décongélation répétées des réactifs doivent être évitées autant que possible.Avant utilisation, les réactifs doivent être complètement décongelés et centrifugés à 8 000 tr/min pendant plusieurs secondes.
4. Veuillez placer la pipette utilisée dans la zone de préparation des échantillons dans le récipient contenant le désinfectant et la jeter avec les déchets après la stérilisation.
5. Après l'expérience, la table de travail et la pipette doivent être traitées avec de l'hypochlorite à 10 % ou de l'alcool à 75 % ou une lampe ultraviolette.
【Fabrication】
Nom: Shandong Xinda Gene Technology Co., Ltd
Une filiale du Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Adresse: Bâtiment B2, parc industriel de Bandaohuigu, route de Shungeng, ville de Zhucheng, province du Shandong
Code postal : 262233
Téléphone : +86 - 0532 5882 0810
