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Kit de détection du virus de la grippe aviaire H5/H7/ARN de sous-type universel (PCR-Fluorescence Probing)
【Nom du produit】Kit de détection du virus de la grippe aviaire H5/H7/ARN de sous-type universel (PCR-Fluorescence Probing)
【Emballer】50 trousses/boîte
【Indication】Le kit de détection du virus de la grippe aviaire H5/H7/Universal RNA (PCR-Fluorescence Probing) est applicable pour détecter le virus de la grippe aviaire H5/H7/Universal RNA dans un écouvillon de gorge aviaire, un écouvillon de cloaque, des tissus, du liquide allantoïdien d'embryon de poulet et une culture cellulaire .Les résultats des tests sont à des fins de recherche uniquement et non à des fins de diagnostic clinique.
【Principaux composants et contenu】
Nom | spécification | Quantité |
H5/H7/Solution de réaction trivalente universelle | 1250µl/tube | 1 |
H5/H7/Contrôle positif universel | 250µl/tube | 1 |
Contrôle négatif | 250µl/tube | 1 |
【Stockage et durée de conservation】
Stocké à -20 ± 5 ℃, congélation et décongélation répétées ≤ 3 fois, la durée de conservation est de 12 mois.
【Modèle】
ABI 7500, ABI QuantStudio 5, CFX Connect, CFX Opus 96, LightCycler480, Gentiter 96E/96R, LineGene 9600 Plus et autres amplificateurs PCR quantitatifs fluorescents.
【Méthode d'essai】
1. Extraction d'acide nucléique
Le kit d'extraction d'ARN commercialisé peut être réalisé pour l'extraction d'acide nucléique, veuillez suivre les instructions du kit.
2. Amplification PCR
2.1 Calculez le nombre d'échantillons à tester, prenez n+2 tubes de réaction PCR et ajoutez 25 µl de solution de réaction dans chaque tube.
2.2 Ajouter 5 µl d'acide nucléique de contrôle négatif, de contrôle positif et d'échantillons dans les tubes de réaction PRC ci-dessus respectivement, centrifuger à 8 000 rpm pendant plusieurs secondes et les placer dans l'amplificateur PCR quantitatif fluorescent.
2.3 Les conditions de réaction sont fixées comme suit :
Paramètres pertinents de l'amplificateur | |||
Système | Volume total : 30 µl | ||
Collecte de signaux | Grippe Aviaire H5/H7/Universel | Sous-type H5 - Le canal HEX recueille le signal de fluorescence | |
Sous-type H7 - Le canal FAM recueille le signal de fluorescence | |||
Universel - Le canal ROX collecte le signal de fluorescence | |||
Conditions de réaction PCR | Organiser | Condition | Numéro de cycle |
Transcription inversée | 55℃ : 15 minutes | 1 | |
Prédégénérescence | 95℃ : 30 secondes | 1 | |
PCR | 95℃ : 10 secondes | 40 | |
56℃ : 30 secondes (Réglé pour collecter le signal fluorescent à la fin de cette étape) | |||
【Interprétation des résultats】
1. Détermination de l'efficacité du kit de test :
(1) Contrôle positif faible : valeur Ct des canaux FAM, HEX et ROX ≤ 32, courbe d'amplification avec une phase exponentielle évidente.
(2) Contrôle vide : les canaux FAM, HEX et ROX n'ont pas de courbe d'amplification, ou la courbe d'amplification est droite ou légèrement oblique, pas de phase exponentielle significative et valeur Ct ≥ 38 ou pas de valeur Ct.
2. Détermination des résultats :
Jugement du résultat | Chaîne FAM | Canal HEX | Canal ROX |
Acide nucléique du sous-type H5 du virus de la grippe aviaire positif | - | + | + |
Acide nucléique du sous-type H7 du virus de la grippe aviaire positif | + | - | + |
Acide nucléique faiblement pathogène du virus de l'influenza aviaire positif | - | - | + |
Acide nucléique de sous-type H5/H7 du virus de la grippe aviaire positif | + | + | + |
Acide nucléique du virus de la grippe aviaire négatif | - | - | - |
*Note:
(1) S'il existe une courbe d'amplification de phase de croissance logarithmique et une valeur Ct ≤ 36, elle est jugée comme +.S'il n'y a pas de courbe d'amplification ou de valeur Ct > 36, elle est jugée comme -.Les échantillons sont suspects lorsque 36 < valeur Ct <40, qui doit être retesté.
(2) Si le résultat d'un sous-type H5/H7 est + avec canal ROX -, il doit être retesté.
【Précautions】
1. La gestion du laboratoire doit être strictement conforme aux spécifications de gestion du laboratoire d'amplification génique par PCR.Le personnel du laboratoire doit être formé professionnellement.Le processus d'expérimentation doit être mené strictement dans différentes zones (zone de préparation des réactifs, zone de préparation des échantillons, zone d'amplification et d'analyse des produits).Tous les consommables doivent être jetables après stérilisation.Les appareils, équipements et fournitures spéciaux à chaque étape de l'opération expérimentale ne doivent pas être utilisés de manière croisée.
2. Veuillez préparer l'enceinte de sécurité biologique pour l'étape de préparation des réactifs et des échantillons.La blouse de laboratoire, les gants jetables et la pipette doivent être effectués pendant l'expérience.
3. La congélation et la décongélation répétées des réactifs doivent être évitées autant que possible.Avant utilisation, les réactifs doivent être complètement décongelés et centrifugés à 8 000 tr/min pendant plusieurs secondes.
4. Veuillez placer la pipette utilisée dans la zone de préparation des échantillons dans le récipient contenant le désinfectant et la jeter avec les déchets après la stérilisation.
5. Après l'expérience, la table de travail et le pipetteur ont été traités avec de l'hypochlorite à 10 % ou de l'alcool à 75 % ou une lampe ultraviolette.
【Fabrication】
Nom: Shandong Xinda Gene Technology Co., Ltd
Une filiale du Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Adresse: Bâtiment B2, parc industriel de Bandaohuigu, route de Shungeng, ville de Zhucheng, province du Shandong
Code postal : 262233
Téléphone : +86 - 0532 5882 0810
Kit de détection du virus de la grippe aviaire H5/H7/ARN de sous-type universel (PCR-Fluorescence Probing)
【Nom du produit】Kit de détection du virus de la grippe aviaire H5/H7/ARN de sous-type universel (PCR-Fluorescence Probing)
【Emballer】50 trousses/boîte
【Indication】Le kit de détection du virus de la grippe aviaire H5/H7/Universal RNA (PCR-Fluorescence Probing) est applicable pour détecter le virus de la grippe aviaire H5/H7/Universal RNA dans un écouvillon de gorge aviaire, un écouvillon de cloaque, des tissus, du liquide allantoïdien d'embryon de poulet et une culture cellulaire .Les résultats des tests sont à des fins de recherche uniquement et non à des fins de diagnostic clinique.
【Principaux composants et contenu】
Nom | spécification | Quantité |
H5/H7/Solution de réaction trivalente universelle | 1250µl/tube | 1 |
H5/H7/Contrôle positif universel | 250µl/tube | 1 |
Contrôle négatif | 250µl/tube | 1 |
【Stockage et durée de conservation】
Stocké à -20 ± 5 ℃, congélation et décongélation répétées ≤ 3 fois, la durée de conservation est de 12 mois.
【Modèle】
ABI 7500, ABI QuantStudio 5, CFX Connect, CFX Opus 96, LightCycler480, Gentiter 96E/96R, LineGene 9600 Plus et autres amplificateurs PCR quantitatifs fluorescents.
【Méthode d'essai】
1. Extraction d'acide nucléique
Le kit d'extraction d'ARN commercialisé peut être réalisé pour l'extraction d'acide nucléique, veuillez suivre les instructions du kit.
2. Amplification PCR
2.1 Calculez le nombre d'échantillons à tester, prenez n+2 tubes de réaction PCR et ajoutez 25 µl de solution de réaction dans chaque tube.
2.2 Ajouter 5 µl d'acide nucléique de contrôle négatif, de contrôle positif et d'échantillons dans les tubes de réaction PRC ci-dessus respectivement, centrifuger à 8 000 rpm pendant plusieurs secondes et les placer dans l'amplificateur PCR quantitatif fluorescent.
2.3 Les conditions de réaction sont fixées comme suit :
Paramètres pertinents de l'amplificateur | |||
Système | Volume total : 30 µl | ||
Collecte de signaux | Grippe Aviaire H5/H7/Universel | Sous-type H5 - Le canal HEX recueille le signal de fluorescence | |
Sous-type H7 - Le canal FAM recueille le signal de fluorescence | |||
Universel - Le canal ROX collecte le signal de fluorescence | |||
Conditions de réaction PCR | Organiser | Condition | Numéro de cycle |
Transcription inversée | 55℃ : 15 minutes | 1 | |
Prédégénérescence | 95℃ : 30 secondes | 1 | |
PCR | 95℃ : 10 secondes | 40 | |
56℃ : 30 secondes (Réglé pour collecter le signal fluorescent à la fin de cette étape) | |||
【Interprétation des résultats】
1. Détermination de l'efficacité du kit de test :
(1) Contrôle positif faible : valeur Ct des canaux FAM, HEX et ROX ≤ 32, courbe d'amplification avec une phase exponentielle évidente.
(2) Contrôle vide : les canaux FAM, HEX et ROX n'ont pas de courbe d'amplification, ou la courbe d'amplification est droite ou légèrement oblique, pas de phase exponentielle significative et valeur Ct ≥ 38 ou pas de valeur Ct.
2. Détermination des résultats :
Jugement du résultat | Chaîne FAM | Canal HEX | Canal ROX |
Acide nucléique du sous-type H5 du virus de la grippe aviaire positif | - | + | + |
Acide nucléique du sous-type H7 du virus de la grippe aviaire positif | + | - | + |
Acide nucléique faiblement pathogène du virus de l'influenza aviaire positif | - | - | + |
Acide nucléique de sous-type H5/H7 du virus de la grippe aviaire positif | + | + | + |
Acide nucléique du virus de la grippe aviaire négatif | - | - | - |
*Note:
(1) S'il existe une courbe d'amplification de phase de croissance logarithmique et une valeur Ct ≤ 36, elle est jugée comme +.S'il n'y a pas de courbe d'amplification ou de valeur Ct > 36, elle est jugée comme -.Les échantillons sont suspects lorsque 36 < valeur Ct <40, qui doit être retesté.
(2) Si le résultat d'un sous-type H5/H7 est + avec canal ROX -, il doit être retesté.
【Précautions】
1. La gestion du laboratoire doit être strictement conforme aux spécifications de gestion du laboratoire d'amplification génique par PCR.Le personnel du laboratoire doit être formé professionnellement.Le processus d'expérimentation doit être mené strictement dans différentes zones (zone de préparation des réactifs, zone de préparation des échantillons, zone d'amplification et d'analyse des produits).Tous les consommables doivent être jetables après stérilisation.Les appareils, équipements et fournitures spéciaux à chaque étape de l'opération expérimentale ne doivent pas être utilisés de manière croisée.
2. Veuillez préparer l'enceinte de sécurité biologique pour l'étape de préparation des réactifs et des échantillons.La blouse de laboratoire, les gants jetables et la pipette doivent être effectués pendant l'expérience.
3. La congélation et la décongélation répétées des réactifs doivent être évitées autant que possible.Avant utilisation, les réactifs doivent être complètement décongelés et centrifugés à 8 000 tr/min pendant plusieurs secondes.
4. Veuillez placer la pipette utilisée dans la zone de préparation des échantillons dans le récipient contenant le désinfectant et la jeter avec les déchets après la stérilisation.
5. Après l'expérience, la table de travail et le pipetteur ont été traités avec de l'hypochlorite à 10 % ou de l'alcool à 75 % ou une lampe ultraviolette.
【Fabrication】
Nom: Shandong Xinda Gene Technology Co., Ltd
Une filiale du Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Adresse: Bâtiment B2, parc industriel de Bandaohuigu, route de Shungeng, ville de Zhucheng, province du Shandong
Code postal : 262233
Téléphone : +86 - 0532 5882 0810
