État de disponibilité: | |
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Kit de détection PCR en temps réel pour le virus de la peste porcine africaine (MGF/CD2V/VP72)
【Nom du produit】
Kit de détection par PCR en temps réel du virus de la peste porcine africaine (MGF/CD2V/VP72)
【Emballer】
50 trousses/boîte
【Principaux composants et contenu】
Nom | spécification | Quantité |
Solution de réaction ASFV (MGF/CD2V/VP72) | 1000µl/tube | 1 |
Contrôle positif ASFV (MGF/CD2V/VP72) | 250µl/tube | 1 |
Contrôle négatif | 250µl/tube | 1 |
【Stockage et durée de conservation】
Stocké à -20±5℃
,Congélation et décongélation répétées ≤ 3 fois, la durée de conservation est de 12 mois.
【Méthode d'essai】
1. Extraction d'acide nucléique
Le kit d'extraction d'ADN commercialisé peut être réalisé pour l'extraction d'acide nucléique, veuillez suivre les instructions du kit.
2. Amplification PCR
2.1 Calculez le nombre d'échantillons à tester, prenez n+2 tubes de réaction PCR et ajoutez 20 µl de solution de réaction dans chaque tube.
2.2 Ajouter 5µl L'acide nucléique du contrôle négatif, du contrôle positif et des échantillons dans les tubes de réaction PCR ci-dessus respectivement, centrifuger à 8000 tr/min pendant plusieurs secondes et les mettre dans l'amplificateur PCR quantitatif fluorescent.
2.3 Les conditions de réaction sont fixées comme suit :
Paramètres pertinents de l'amplificateur | |||
Système | Volume total : 30 µl | ||
Collecte de signaux
| Signal fluorescent ASFV (MGF/CD2V/VP72)
| Le canal VP72-FAM collecte le signal de fluorescence | |
Le canal CD2V-VIC/HEX recueille le signal de fluorescence | |||
Le canal MGF-CY5 recueille le signal de fluorescence | |||
Conditions de réaction PCR
| Organiser | Condition | Numéro de cycle |
Traitement UNG | 37℃ : 2 minutes | 1 | |
Prédégénérescence | 95℃ : 30 secondes | 1 | |
PCR
| 95℃ : 10 secondes |
40
| |
56℃ : 30 secondes (Réglé pour collecter le signal fluorescent à la fin de cette étape) |
【Interprétation des résultats】
1. Détermination de l'efficacité du kit de test :
(1) Contrôle positif : valeur Ct des canaux FAM, HEX/VIC et CY5 ≤ 32, courbe d'amplification avec une phase exponentielle évidente.
(2) Contrôle négatif : les canaux FAM, HEX/VIC et CY5 n'ont pas de courbe d'amplification, ou la courbe d'amplification est droite ou légèrement oblique, pas de phase exponentielle significative et valeur Ct ≥ 38 ou pas de valeur Ct.
2. Détermination des résultats :
Jugement du résultat | Chaîne FAM | Canal HEX/VIC | Canal CY5 |
Acide nucléique VP72 ASFV positif | + | - | - |
Acide nucléique CD2V ASFV positif | - | + | - |
Acide nucléique MGF ASFV positif | - | - | + |
Acide nucléique VP72 et CD2V ASFV positif | + | + | - |
Acide nucléique VP72 et MGF ASFV positif | + | - | + |
Acide nucléique CD2V et MGF ASFV positif | - | + | + |
Acide nucléique MGF, CD2V et VP72 ASFV positif | + | + | + |
Acide nucléique MGF, CD2V et VP72 ASFV négatif | - | - | - |
*Note:
(1) S'il existe une courbe d'amplification de phase de croissance logarithmique et une valeur Ct ≤ 35, elle est jugée comme +.S'il n'y a pas de courbe d'amplification ou de valeur Ct > 38, elle est jugée comme -.Les échantillons sont suspects lorsque 35 < valeur Ct <38, qui doit être retesté.Si la valeur Ct du résultat retesté est toujours comprise entre 35 et 38 avec une phase de croissance logarithmique évidente, elle est jugée positive, sinon négative.
【Précautions】
1. La gestion du laboratoire doit être strictement conforme aux spécifications de gestion du laboratoire d'amplification génique par PCR.Le personnel du laboratoire doit être formé professionnellement.Le processus d'expérimentation doit être mené strictement dans différentes zones (zone de préparation des réactifs, zone de préparation des échantillons, zone d'amplification et d'analyse des produits).Tous les consommables doivent être jetables après stérilisation.Les appareils, équipements et fournitures spéciaux à chaque étape de l'opération expérimentale ne doivent pas être utilisés de manière croisée.
2. Veuillez préparer l'enceinte de sécurité biologique pour l'étape de préparation des réactifs et des échantillons.La blouse de laboratoire, les gants jetables et la pipette doivent être effectués pendant l'expérience.
3. La congélation et la décongélation répétées des réactifs doivent être évitées autant que possible.Avant utilisation, les réactifs doivent être complètement décongelés et centrifugés à 8 000 tr/min pendant plusieurs secondes.
4. Veuillez placer la pipette utilisée dans la zone de préparation des échantillons dans le récipient contenant le désinfectant et la jeter avec les déchets après la stérilisation.
5. Après l'expérience, la table de travail et le pipetteur ont été traités avec de l'hypochlorite à 10 % ou de l'alcool à 75 % ou une lampe ultraviolette.
【Fabrication】
Nom: Shandong Xinda Gene Technology Co., Ltd
Une filiale du Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Adresse: Bâtiment B2, parc industriel de Bandaohuigu, route de Shungeng, ville de Zhucheng, province du Shandong
Code postal : 262233
Téléphone: +86 - 0532 5882 0810
Kit de détection PCR en temps réel pour le virus de la peste porcine africaine (MGF/CD2V/VP72)
【Nom du produit】
Kit de détection par PCR en temps réel du virus de la peste porcine africaine (MGF/CD2V/VP72)
【Emballer】
50 trousses/boîte
【Principaux composants et contenu】
Nom | spécification | Quantité |
Solution de réaction ASFV (MGF/CD2V/VP72) | 1000µl/tube | 1 |
Contrôle positif ASFV (MGF/CD2V/VP72) | 250µl/tube | 1 |
Contrôle négatif | 250µl/tube | 1 |
【Stockage et durée de conservation】
Stocké à -20±5℃
,Congélation et décongélation répétées ≤ 3 fois, la durée de conservation est de 12 mois.
【Méthode d'essai】
1. Extraction d'acide nucléique
Le kit d'extraction d'ADN commercialisé peut être réalisé pour l'extraction d'acide nucléique, veuillez suivre les instructions du kit.
2. Amplification PCR
2.1 Calculez le nombre d'échantillons à tester, prenez n+2 tubes de réaction PCR et ajoutez 20 µl de solution de réaction dans chaque tube.
2.2 Ajouter 5µl L'acide nucléique du contrôle négatif, du contrôle positif et des échantillons dans les tubes de réaction PCR ci-dessus respectivement, centrifuger à 8000 tr/min pendant plusieurs secondes et les mettre dans l'amplificateur PCR quantitatif fluorescent.
2.3 Les conditions de réaction sont fixées comme suit :
Paramètres pertinents de l'amplificateur | |||
Système | Volume total : 30 µl | ||
Collecte de signaux
| Signal fluorescent ASFV (MGF/CD2V/VP72)
| Le canal VP72-FAM collecte le signal de fluorescence | |
Le canal CD2V-VIC/HEX recueille le signal de fluorescence | |||
Le canal MGF-CY5 recueille le signal de fluorescence | |||
Conditions de réaction PCR
| Organiser | Condition | Numéro de cycle |
Traitement UNG | 37℃ : 2 minutes | 1 | |
Prédégénérescence | 95℃ : 30 secondes | 1 | |
PCR
| 95℃ : 10 secondes |
40
| |
56℃ : 30 secondes (Réglé pour collecter le signal fluorescent à la fin de cette étape) |
【Interprétation des résultats】
1. Détermination de l'efficacité du kit de test :
(1) Contrôle positif : valeur Ct des canaux FAM, HEX/VIC et CY5 ≤ 32, courbe d'amplification avec une phase exponentielle évidente.
(2) Contrôle négatif : les canaux FAM, HEX/VIC et CY5 n'ont pas de courbe d'amplification, ou la courbe d'amplification est droite ou légèrement oblique, pas de phase exponentielle significative et valeur Ct ≥ 38 ou pas de valeur Ct.
2. Détermination des résultats :
Jugement du résultat | Chaîne FAM | Canal HEX/VIC | Canal CY5 |
Acide nucléique VP72 ASFV positif | + | - | - |
Acide nucléique CD2V ASFV positif | - | + | - |
Acide nucléique MGF ASFV positif | - | - | + |
Acide nucléique VP72 et CD2V ASFV positif | + | + | - |
Acide nucléique VP72 et MGF ASFV positif | + | - | + |
Acide nucléique CD2V et MGF ASFV positif | - | + | + |
Acide nucléique MGF, CD2V et VP72 ASFV positif | + | + | + |
Acide nucléique MGF, CD2V et VP72 ASFV négatif | - | - | - |
*Note:
(1) S'il existe une courbe d'amplification de phase de croissance logarithmique et une valeur Ct ≤ 35, elle est jugée comme +.S'il n'y a pas de courbe d'amplification ou de valeur Ct > 38, elle est jugée comme -.Les échantillons sont suspects lorsque 35 < valeur Ct <38, qui doit être retesté.Si la valeur Ct du résultat retesté est toujours comprise entre 35 et 38 avec une phase de croissance logarithmique évidente, elle est jugée positive, sinon négative.
【Précautions】
1. La gestion du laboratoire doit être strictement conforme aux spécifications de gestion du laboratoire d'amplification génique par PCR.Le personnel du laboratoire doit être formé professionnellement.Le processus d'expérimentation doit être mené strictement dans différentes zones (zone de préparation des réactifs, zone de préparation des échantillons, zone d'amplification et d'analyse des produits).Tous les consommables doivent être jetables après stérilisation.Les appareils, équipements et fournitures spéciaux à chaque étape de l'opération expérimentale ne doivent pas être utilisés de manière croisée.
2. Veuillez préparer l'enceinte de sécurité biologique pour l'étape de préparation des réactifs et des échantillons.La blouse de laboratoire, les gants jetables et la pipette doivent être effectués pendant l'expérience.
3. La congélation et la décongélation répétées des réactifs doivent être évitées autant que possible.Avant utilisation, les réactifs doivent être complètement décongelés et centrifugés à 8 000 tr/min pendant plusieurs secondes.
4. Veuillez placer la pipette utilisée dans la zone de préparation des échantillons dans le récipient contenant le désinfectant et la jeter avec les déchets après la stérilisation.
5. Après l'expérience, la table de travail et le pipetteur ont été traités avec de l'hypochlorite à 10 % ou de l'alcool à 75 % ou une lampe ultraviolette.
【Fabrication】
Nom: Shandong Xinda Gene Technology Co., Ltd
Une filiale du Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Adresse: Bâtiment B2, parc industriel de Bandaohuigu, route de Shungeng, ville de Zhucheng, province du Shandong
Code postal : 262233
Téléphone: +86 - 0532 5882 0810