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Real-time PCR Detection Kit for Porcine Epidemic Diarrhée, Gastro-entérite transmissible et Virus de la maladie du deltacoronavirus porcin
[Nom du produit] Kit de détection par PCR en temps réel pour la diarrhée épidémique porcine, la gastro-entérite transmissible et le virus de la maladie du deltacoronavirus porcin
[Emballer] 50 essais
[Indication] Le kit de détection par PCR en temps réel pour la diarrhée épidémique porcine, la gastro-entérite transmissible et le virus de la maladie du deltacoronavirus porcin est applicable pour la détection, le typage, le diagnostic auxiliaire et l'investigation épidémiologique du PED/TGEV/PDCoV dans le sérum porcin, le plasma, le tissu intestinal, le contenu intestinal, ganglions lymphatiques mésentériques, excréments et autres échantillons.Les résultats des tests sont à des fins de recherche uniquement et non à des fins de diagnostic clinique.
[Principaux composants et contenu]
Nom | spécification | Quantité |
Solution de réaction PED/TGEV/PDCoV | 1000µl/Tube | 1 |
Contrôle positif PED/TGEV/PDCoV | 250µl/Tube | 1 |
Contrôle négatif | 250µl/Tube | 1 |
[Stockage et durée de conservation]
Stocké à -20 ± 5 ℃, congélation et décongélation répétées ≤ 3 fois, la durée de conservation est de 12 mois.
[Modèle]
Pour ABI QuantStudio 5、CFX Opus 96、LightCycler480、Gentier 96E/96R、LineGene 9600 Plus et autres thermocycleurs.
[Méthode d'essai]
1. Extraction d'acide nucléique
Un kit d'extraction d'ADN/ARN commercialisé peut être réalisé pour l'extraction d'acide nucléique, veuillez suivre les instructions du kit.
2. Amplification PCR
2.1 Calculer le nombre d'échantillons à tester, prendre n+2 tubes de réaction PCR et ajouter 20µl de solution réactionnelle dans chaque tube.
2.2 Ajouter 5µl l'acide nucléique du contrôle négatif, du contrôle positif et des échantillons dans les tubes de réaction PRC ci-dessus respectivement, centrifuger à 8 000 tr/min pendant plusieurs secondes et les placer dans le thermocycleur.
2.3 Les conditions de réaction sont fixées comme suit :
Paramètres pertinents de l'amplificateur | |||
Système | Volume total : 30 µl | ||
Collecte de signaux | Diarrhée épidémique porcine (DEP) - Le canal FAM recueille le signal de fluorescence | ||
Gastro-entérite transmissible (TGEV) - Le canal HEX/VIC recueille le signal de fluorescence | |||
Virus de la maladie du deltacoronavirus porcin (PDCoV) - Le canal Cy5 recueille le signal de fluorescence | |||
Conditions de réaction PCR | Organiser | Condition | Numéro de cycle |
Transcription inversée | 55℃ : 15 minutes | 1 | |
Prédégénérescence | 95℃ : 30 secondes | 1 | |
PCR | 95℃ : 10 secondes |
40 | |
60℃ : 30 secondes (Réglé pour collecter le signal fluorescent à la fin de cette étape) | |||
[Interprétation des résultats]
1. Détermination de l'efficacité du kit de test :
(1) Contrôle positif : valeur Ct des canaux FAM, HEX/VIC et Cy5 ≤ 32, courbe d'amplification avec une phase exponentielle évidente.
(2) Contrôle négatif : les canaux FAM, HEX/VIC et Cy5 n'ont pas de courbe d'amplification, ou la courbe d'amplification est droite ou légèrement oblique.
2. Détermination des résultats :
Jugement du résultat | Chaîne FAM | Canal HEX/VIC | Canal Cy5 |
PED acide positif | + | - | - |
Acide nucléique TGEV positif | - | + | - |
Acide nucléique PDCoV positif | - | - | + |
Acide nucléique PED et TGEV positif | + | + | - |
Acide nucléique PED et PDCoV positif | + | - | + |
Acide nucléique TGEV et PDCoV positif | - | + | + |
Acide nucléique PED, TGEV et PDCoV positif | + | + | + |
Acide nucléique PED, TGEV et PDCoV négatif | - | - | - |
*Note:
S'il existe une courbe d'amplification de croissance exponentielle et une valeur Ct ≤ 36, elle est déterminée par '+'.
S'il n'y a pas de courbe d'amplification, elle est déterminée comme '-'.
Si 36 < Valeur Ct < 40, c'est un échantillon douteux, et l'analyse doit être répétée pour confirmation.
[Précautions]
1. La direction du laboratoire doit suivre strictement les spécifications de gestion du laboratoire d'amplification génique par PCR.Le personnel du laboratoire doit être formé professionnellement.Le processus d'expérimentation doit être mené strictement dans différentes zones (zone de préparation des réactifs, zone de préparation des échantillons, zone d'amplification et d'analyse des produits).Tous les consommables doivent être jetables après stérilisation.Les appareils, équipements et fournitures spéciaux à chaque étape de l'opération expérimentale ne doivent pas être utilisés de manière croisée.
2. Veuillez préparer l'enceinte de sécurité biologique pour l'étape de préparation des réactifs et des échantillons.La blouse de laboratoire, les gants jetables et la pipette doivent être effectués pendant l'expérience.
3. La congélation et la décongélation répétées des réactifs doivent être évitées autant que possible.Avant utilisation, les réactifs doivent être complètement décongelés et centrifugés à 8 000 tr/min pendant plusieurs secondes.
4. Veuillez placer la pipette utilisée dans la zone de préparation des échantillons dans le récipient contenant le désinfectant et la jeter avec les déchets après la stérilisation.
5. Après l'expérience, la table de travail et la pipette doivent être traitées avec de l'hypochlorite à 10 % ou de l'alcool à 75 % ou une lampe ultraviolette.
[Fabrication]
Nom: Shandong Xinda Gene Technology Co., Ltd
Une filiale du Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Adresse: Bâtiment B2, parc industriel de Bandaohuigu, route de Shungeng, ville de Zhucheng, province du Shandong
Code postal : 262233
Téléphone : +86 - 0532 5882 0810
Real-time PCR Detection Kit for Porcine Epidemic Diarrhée, Gastro-entérite transmissible et Virus de la maladie du deltacoronavirus porcin
[Nom du produit] Kit de détection par PCR en temps réel pour la diarrhée épidémique porcine, la gastro-entérite transmissible et le virus de la maladie du deltacoronavirus porcin
[Emballer] 50 essais
[Indication] Le kit de détection par PCR en temps réel pour la diarrhée épidémique porcine, la gastro-entérite transmissible et le virus de la maladie du deltacoronavirus porcin est applicable pour la détection, le typage, le diagnostic auxiliaire et l'investigation épidémiologique du PED/TGEV/PDCoV dans le sérum porcin, le plasma, le tissu intestinal, le contenu intestinal, ganglions lymphatiques mésentériques, excréments et autres échantillons.Les résultats des tests sont à des fins de recherche uniquement et non à des fins de diagnostic clinique.
[Principaux composants et contenu]
Nom | spécification | Quantité |
Solution de réaction PED/TGEV/PDCoV | 1000µl/Tube | 1 |
Contrôle positif PED/TGEV/PDCoV | 250µl/Tube | 1 |
Contrôle négatif | 250µl/Tube | 1 |
[Stockage et durée de conservation]
Stocké à -20 ± 5 ℃, congélation et décongélation répétées ≤ 3 fois, la durée de conservation est de 12 mois.
[Modèle]
Pour ABI QuantStudio 5、CFX Opus 96、LightCycler480、Gentier 96E/96R、LineGene 9600 Plus et autres thermocycleurs.
[Méthode d'essai]
1. Extraction d'acide nucléique
Un kit d'extraction d'ADN/ARN commercialisé peut être réalisé pour l'extraction d'acide nucléique, veuillez suivre les instructions du kit.
2. Amplification PCR
2.1 Calculer le nombre d'échantillons à tester, prendre n+2 tubes de réaction PCR et ajouter 20µl de solution réactionnelle dans chaque tube.
2.2 Ajouter 5µl l'acide nucléique du contrôle négatif, du contrôle positif et des échantillons dans les tubes de réaction PRC ci-dessus respectivement, centrifuger à 8 000 tr/min pendant plusieurs secondes et les placer dans le thermocycleur.
2.3 Les conditions de réaction sont fixées comme suit :
Paramètres pertinents de l'amplificateur | |||
Système | Volume total : 30 µl | ||
Collecte de signaux | Diarrhée épidémique porcine (DEP) - Le canal FAM recueille le signal de fluorescence | ||
Gastro-entérite transmissible (TGEV) - Le canal HEX/VIC recueille le signal de fluorescence | |||
Virus de la maladie du deltacoronavirus porcin (PDCoV) - Le canal Cy5 recueille le signal de fluorescence | |||
Conditions de réaction PCR | Organiser | Condition | Numéro de cycle |
Transcription inversée | 55℃ : 15 minutes | 1 | |
Prédégénérescence | 95℃ : 30 secondes | 1 | |
PCR | 95℃ : 10 secondes |
40 | |
60℃ : 30 secondes (Réglé pour collecter le signal fluorescent à la fin de cette étape) | |||
[Interprétation des résultats]
1. Détermination de l'efficacité du kit de test :
(1) Contrôle positif : valeur Ct des canaux FAM, HEX/VIC et Cy5 ≤ 32, courbe d'amplification avec une phase exponentielle évidente.
(2) Contrôle négatif : les canaux FAM, HEX/VIC et Cy5 n'ont pas de courbe d'amplification, ou la courbe d'amplification est droite ou légèrement oblique.
2. Détermination des résultats :
Jugement du résultat | Chaîne FAM | Canal HEX/VIC | Canal Cy5 |
PED acide positif | + | - | - |
Acide nucléique TGEV positif | - | + | - |
Acide nucléique PDCoV positif | - | - | + |
Acide nucléique PED et TGEV positif | + | + | - |
Acide nucléique PED et PDCoV positif | + | - | + |
Acide nucléique TGEV et PDCoV positif | - | + | + |
Acide nucléique PED, TGEV et PDCoV positif | + | + | + |
Acide nucléique PED, TGEV et PDCoV négatif | - | - | - |
*Note:
S'il existe une courbe d'amplification de croissance exponentielle et une valeur Ct ≤ 36, elle est déterminée par '+'.
S'il n'y a pas de courbe d'amplification, elle est déterminée comme '-'.
Si 36 < Valeur Ct < 40, c'est un échantillon douteux, et l'analyse doit être répétée pour confirmation.
[Précautions]
1. La direction du laboratoire doit suivre strictement les spécifications de gestion du laboratoire d'amplification génique par PCR.Le personnel du laboratoire doit être formé professionnellement.Le processus d'expérimentation doit être mené strictement dans différentes zones (zone de préparation des réactifs, zone de préparation des échantillons, zone d'amplification et d'analyse des produits).Tous les consommables doivent être jetables après stérilisation.Les appareils, équipements et fournitures spéciaux à chaque étape de l'opération expérimentale ne doivent pas être utilisés de manière croisée.
2. Veuillez préparer l'enceinte de sécurité biologique pour l'étape de préparation des réactifs et des échantillons.La blouse de laboratoire, les gants jetables et la pipette doivent être effectués pendant l'expérience.
3. La congélation et la décongélation répétées des réactifs doivent être évitées autant que possible.Avant utilisation, les réactifs doivent être complètement décongelés et centrifugés à 8 000 tr/min pendant plusieurs secondes.
4. Veuillez placer la pipette utilisée dans la zone de préparation des échantillons dans le récipient contenant le désinfectant et la jeter avec les déchets après la stérilisation.
5. Après l'expérience, la table de travail et la pipette doivent être traitées avec de l'hypochlorite à 10 % ou de l'alcool à 75 % ou une lampe ultraviolette.
[Fabrication]
Nom: Shandong Xinda Gene Technology Co., Ltd
Une filiale du Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Adresse: Bâtiment B2, parc industriel de Bandaohuigu, route de Shungeng, ville de Zhucheng, province du Shandong
Code postal : 262233
Téléphone : +86 - 0532 5882 0810
